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CRISPRa技术优化人类细胞高效重编程

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主讲文章

赫尔辛基大学RasTrokovic团队于年1月20日在StemCellReports期刊发表题为“CRISPRactivationenableshigh-fidelityreprogrammingintohumanpluripotentstemcells”的文章。研究中利用优化的CRISPRa基因编辑技术将人类细胞重编程为多能性干细胞状态,该技术可以将细胞重编程控制到比以前更精确、更高效。

主要研究内容

MainResearchContents

多能干细胞(Pluripotentstemcell,PSC)是当前干细胞研究的热点和焦点,在阿尔茨海默病、糖尿病及眼科疾病的治疗中提供了有效的工具。年,科学家应用人和鼠的正常皮肤细胞,导入KLF4、OCT4、SOX2和C-MYC基因,实现了正常体细胞向多能干细胞的成功转化转,这种通过基因诱导产生的多能干细胞称为诱导多能干细胞(iPSC)。文章指出研究人员通过靶向EEA基序及miR-/等实现了原代成纤维细胞系及LCL的重编程,并进一步提高了重编程效率。

CRISPRa介导的重编程是一种诱导多能性的新方法。与传统的转基因重编程方法相比,CRISPRa可以通过激活细胞内源基因实现重编程过程,而且这一过程产生的细胞与早期胚胎细胞相似,但其重编程轨迹尚不清楚。研究人员结合单细胞测序技术对重编程过程进行分析,与其他激活条件相比,靶向EEA基序及miR-/后CRISPRa激活的细胞能更快进入iPSC状态,而且细胞之间的异质性较小。通讯作者Trokovic指出:使用这种优化技术,几乎所有的重编程细胞都是高质量的iPS细胞。

优化的CRISPRa技术加速了细胞重编程过程,明显提高了重编程的准确性和可靠性,同时激活后的iPSC有效避免了伦理和法律问题,因此在医疗领域必将拥有更广阔的应用前景。

陕西省干细胞工程技术中心

图文:鲁国涛

排版:李巴仑

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